當(dāng)前位置:安康市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 > 學(xué)習(xí)交流 > 學(xué)術(shù)論文
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豆腐木又名豆腐柴,臭黃荊,因民間對豆腐柴的加工利用是制成“神仙豆腐”,所以通常稱為神仙葉子樹,系馬鞭草科,屬落葉灌木類,是一種藥食兼用植物,安全性高,既可作為天然果膠的原料,也可作為功能食品開發(fā),又可作為一種藥材使用,含豐富的果膠、植物蛋白質(zhì)、糖類等營養(yǎng)成分,而且含有木栓醇、柚皮素、香草酸等多種藥用成分,其根、莖、葉均可入藥,民間常用來治療蛇咬傷、創(chuàng)傷出血、牙痛、燒傷及痢疾等癥,其葉提取物具有抗疲勞、降低膽固醇等功效,其根提取物也具有增強(qiáng)免疫力等功能。主要分布于我省南部山區(qū)的林下、溝邊、灌木叢中,陰坡多于陽坡。豆腐柴作為一種具有重要營養(yǎng)價值和藥用價值的野生植物資源,近年來逐漸引起了人們的關(guān)注,采取組織培養(yǎng)方法,可有助于進(jìn)行快速繁殖。
1、材料和方法
1.1 材料
外植體來源:帶腋芽嫩莖。
1.2 培養(yǎng)條件
溫度:一般用20~
光照:光照時間為每天12小時,光照度2000Lx。
基本培養(yǎng)基:用MS為基本培養(yǎng)基,生根培養(yǎng)用1/2MS,再附加各種激素,滅菌前PH為5.6~5.8,蔗糖濃度為
2、生長與分化情況
2.1外植體的處理
于晴天選取生長健壯、無病蟲害的植株,取幼嫩芽段,剪除大葉片,置入燒杯中,滴入少許洗滌劑和吐溫20,在流水條件下沖洗30分鐘,送入無菌接種間,放在超凈工作臺上,用75%
酒精滅菌30秒,再用0.1%升汞滅菌8~12分鐘,無菌水沖洗4~5次,無菌濾紙吸干表面水
分,用解刨刀切去基部受損的組織,再切成0.5~
2.2芽誘導(dǎo)培養(yǎng)
將經(jīng)過無菌處理好的材料分別接種在培養(yǎng)基(1)MS+BA1.5mg/L(單位下同)+IAA0.1(2)MS+BA1.0+IAA0.2(3)MS+BA0.5+IAA0.3上,經(jīng)過10~15天的培養(yǎng),所有培養(yǎng)基均能萌動生長,在培養(yǎng)基(1)上經(jīng)過12天開始陸續(xù)分化出芽,在培養(yǎng)基(2)上約15天形成不定芽,但同時有少量不定根形成,在培養(yǎng)基(3)上速度最快,約10天就明顯伸長,分化出芽,結(jié)果表明,培養(yǎng)基(3)誘導(dǎo)效果最佳,用的時間最短,適宜初代培養(yǎng),詳情見表2-1。表2-1不同激素量對豆腐柴的誘導(dǎo)情況
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培養(yǎng)基 |
培養(yǎng)數(shù)(株) |
出芽數(shù)(個) |
培養(yǎng)天數(shù)(天) |
誘導(dǎo)率(%) |
|
1 |
50 |
16 |
12 |
30 |
|
2 |
50 |
25 |
15 |
50 |
|
3 |
50 |
40 |
10 |
80 |
2.3繼代增殖培養(yǎng)
培養(yǎng)30天以后,待誘導(dǎo)出的小苗長至一定程度,剪成一葉一節(jié)的小芽,分別接種到培養(yǎng)基(4)MS+BA1.0+NAA0.6(5)MS+BA1.5+NAA0.4(6 )MS+BA1.0+NAA0.2上,每瓶接種4~6個,培養(yǎng)20天左右,經(jīng)觀察比較,在培養(yǎng)基(4)上增殖倍率為5.8,在培養(yǎng)基(5)上增殖倍率為2.4,在培養(yǎng)基(6)上增殖倍率為3.2,結(jié)果表明,培養(yǎng)基(4)上增殖效果最佳,詳情見表2-2。不斷將芽轉(zhuǎn)接進(jìn)行繼代培養(yǎng),從而可以擴(kuò)大培養(yǎng)規(guī)模,建立快繁增殖體系。
表2-2不同激素量對豆腐柴增殖倍率的影響
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培養(yǎng)基 |
接種數(shù)(株) |
20天后增殖總數(shù)(株) |
增殖率(%) |
|
4 |
45 |
218 |
5.8 |
|
5 |
45 |
97 |
2.4 |
|
6 |
45 |
125 |
3.2 |
2.4生根培養(yǎng)
將生長健壯的幼苗分別轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基(7)MS+BA2.0+NAA0.3和培養(yǎng)基(8)MS+BA2.5+IBA0.5上進(jìn)行誘導(dǎo)生根, 經(jīng)過8~12天培養(yǎng),在培養(yǎng)基(7)上生根率為100%,平均生根數(shù)5條,在培養(yǎng)基(8)上經(jīng)過16天方開始生出少量細(xì)根,生根率為85%,平均生根數(shù)3.9條,由此觀察比較可知,1/2MS對豆腐柴的生根有很大影響,在培養(yǎng)基(7)上生根快,根粗而多,且植株健壯,在培養(yǎng)基(8)上也能生根,但數(shù)量較少,苗瘦弱,選用培養(yǎng)基(7)生根效果最好。詳情見表2-3。
表2-3不同培養(yǎng)基對豆腐柴生根的影響
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培養(yǎng)基 |
生根天數(shù)(天) |
生根率(%) |
平均生根數(shù)(條) |
長勢 |
|
7 |
10 |
100 |
5 |
粗壯 |
|
8 |
16 |
85 |
3.9 |
細(xì)弱 |
3、瓶苗的移栽
生根組培苗不能直接移栽到大田,由于長期生長在恒溫、無菌和養(yǎng)分供應(yīng)充足的條件下,雖然也含有葉綠素,但是以異樣生長為主,生長勢較弱,必須進(jìn)行一段時間的煉苗,具體方法是將生長健旺的生根瓶苗在自然溫度和光照下閉瓶煉苗14天,然后再打開瓶蓋煉苗7天左右,用鑷子取出小苗,防入30~32溫水中洗去附著的培養(yǎng)基,生根粉沾幼苗,移栽于用100倍液多菌靈處理過的苗床上,苗床溫度保持在22~
參考文獻(xiàn):
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[2] 李春華; 廉宏.金葉蕕的組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)研究 [J] 園林科技2009(04);
[3] 李旭群;李曦等.穗花牡荊的組織培養(yǎng)[J]植物生理徐通訊 2009(11);
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作者簡介:楊涼花(1976-),女,本科學(xué)歷,助理農(nóng)藝師,安康市農(nóng)科所職工,從事植物組織培養(yǎng)研究工作。
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